Зачем нужен формалин в вакуумном процессоре
Эти процессоры имеют закрытый контур и закачивают реагенты из канистр в общую реторту, где находятся кассеты с объектами. Гистопроцессоры отличаются ёмкостью рабочей камеры и канистр, а также количеством станций с парафином.
Аппараты с 3 станциями парафина хорошо подходят для биопсий, с 4 станциями – для хирургического и эндоскопического материала.
Имеется еще один тип процессоров, в котором есть несколько ёмкостей для реагентов, закачивающихся в одну камеру и одна рабочая камера с парафином, но он подходит не для всех объектов. Такие процессоры мы рассмотрим в отдельной статье.
Эндоскопический материал может быть проведен в рабочее время в 2 запуска (если делать 3 запуска, то не хватит времени на заливку, если нет второй смены лаборантов).
Хирургический материал проводится только один раз, через ночь (в течение суток).
Важный момент – отсрочка старта процессора. Выполняется в первом, самом загрязненном, спирте. Имеются модели, в которых отсрочка может быть запрограммирована на любой станции.
Фиксация обязательно должна быть вынесена за процессор и выполняться в срок от 24 до 72 часов.
Промывка также выносится за процессор, поскольку объем промывной воды (около 2л) будет совершенно неэффективным для вымывания формалина их тканей.
При наличии у процессора второй реторты, расписание в них не должно отличаться, поскольку объем загружаемого материала может варьировать в каждом случае.
Процессор можно запускать от одного до нескольких раз в день.
— только один раз в день: любое расписание
— дважды в день: только эндобиоптаты, или один эндоскопический и один хирургический прогон (реагенты правильно сменять после хирургического прогона)
— трижды в день: дважды биоптаты и на ночь хирургию (смена реагентов перед хирургией вечером и перед первой эндоскопией — утром).
Так как у всех процессоров емкости с парафином находятся рядом с рабочей камерой, то она неизбежно нагревается во время проводки. Также все процессоры имеют функцию перемешивания. Поэтому время воздействия реагентов можно немного сократить после отладки и валидации протокола проводки.
Расписание для эндоскопических объектов
Чтобы не переставлять лишний раз канистры с реагентами и не пропускать в эндоскопийном расписании станции для обычного хирургического расписания, в эндоскопийном расписании задействуют все хирургические станции с укороченным временем действия реагентов.
Замену реагентов делают перед запуском эндоскопического цикла.
Процессор с 3 станциями парафина (хирургия)
Спирт 40 мин. Вылить после проводки каждой партии.
Спирт 40 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Спирт 40 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Спирт 40 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Спирт 40 мин. Переместить на предыдущую позицию. Залить свежий.
Ксилол 40 мин. Вылить через 5 дней (ежедневного использования).
Ксилол 40 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Ксилол 40 мин. Переместить на предыдущую позицию. Залить свежий.
Парафин 1 час. Вылить через 5 дней (ежедневного использования).
Парафин 1,5 часа. Вылить в предыдущую позицию.
Парафин 1,5 часа. Вылить в предыдущую позицию. Залить свежий.
Процессор с 3 станциями парафина (эндоскопия)
Спирт 8 мин. Вылить после проводки каждой партии.
Спирт 8 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Спирт 8 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Спирт 8 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Спирт 8 мин. Переместить на предыдущую позицию. Залить свежим.
Ксилол 10 мин. Вылить через 5 дней (ежедневного использования).
Ксилол 15 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Ксилол 15 мин. Переместить на предыдущую позицию. Залить свежим.
Парафин 20 мин. Вылить через 5 дней (ежедневного использования).
Парафин 20 мин. Вылить в предыдущую позицию.
Парафин 20 мин. Вылить в предыдущую позицию. Залить свежим.
Процессор с 4 станциями парафина (хирургия)
Спирт 40 мин. Вылить после проводки каждой партии.
Спирт 40 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Спирт 40 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Спирт 40 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Спирт 40 мин. Переместить на предыдущую позицию. Залить свежий.
Ксилол 40 мин. Вылить через 5 дней (ежедневного использования).
Ксилол 40 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Ксилол 40 мин. Переместить на предыдущую позицию. Залить свежий.
Парафин 1 часа. Вылить через 5 дней (ежедневного использования).
Парафин 1 час. Вылить в предыдущую позицию.
Парафин 1 час. Вылить в предыдущую позицию.
Парафин 1 час. Вылить в предыдущую позицию. Залить свежий.
Расписание для проводки хирургических объектов
Недостатки вакуумного процессора
2. При поломках задержка материала в любой из емкостей со всеми неблагоприятными эффектами
3. При выносе фиксации за процессор, пятничный запуск на выходные вынужденно пропускается. Либо загрузку производить в субботу, после фиксации
Histotechnology - club (лаборант-гистотехник) запись закреплена
Какая именно ткань не повелась? Гастро, соскобы, обычная операционка? Какого размера кусочки? Если стандартная операционка, попробуйте все этанолы по часу, без p/v, и парафины по часу (оставьте там p/v).
Дарья, вся перепровелась, т.е сильно уплотнилась. Ткань разная, стандартный набор соскобы, жп, плаценты, и тп. Кусочки тонкие, проводка в кассетах, загрузка небольшая, до 100 кассет.
Светлана Зонова
Роман, а кто рекомендовал расписание проводки? Какой процессор? Вы уверены, что у вас все ок с фиксацией?
На мой взгляд нужно ставить 3 ксилола по 1 часу.
Максим, протокол рекомендовал инсталятор, специалист по настройке и эксплуатации от фирмы. Процессор Сакура VIP 6. Материал операционно-биопсийный, соскобы, жп, плаценты.
С фиксацией норм, т.к до этого в карусельке все хорошо проходило. Протокол по карусельке примерно и поставили, только там банок было меньше.
Роман, то есть жира, кожи, толсто вырезанных кусков нет? Для такого материала можно уменьшить пребывание в первых спиртах.
Максим, обсуждали это с инсталятором, будем смотреть, насколько загрязняться будет реторта, и будем пробовать по разному
Тимур Юнусов ответил Роману
Роман, тоже советую формалин вынести за пределы проводки. Дело не в загрязнении, формалин нужно обязательно промывать водой.
Тимур Юнусов ответил Роману
Роман, попробуйте уменьшить время в спиртах по 20 минут,
5 спирта по 40 минут
3 ксилола по 1 часу
4 парафина по 1 часу
Тимур Юнусов ответил Роману
Роман, да. Я бы сделал не 70% меньше концентрацию 60% это первый запуск, поэтому так уплотнились куски
Тимур Юнусов ответил Роману
Роман, куски все равно уплотняться при первом запуске, нужно поработать неделю, выполнять замену реагентов, уже концентрацию спирта не меняйте. Просто передвигайте последний и выливайте первый, передвигаете на одну емкость вперёд, последний чистый, с ксилолом тоже самое. 6 я бы сделал 50%спирта и 50% ксилола (промежуточную среду), тут вы получите мягкий переход в среду (ксилол) дальше по ксилолу 2 шт.
Замены спирта выполняйте после каждого запуска 50-60 кассет, ксилол раз в неделю с вашим объёмом будет достаточно.
Роман, мы когда перешли на автомат, вся проводка полетела. Причиной оказался формалин. Вынесли из проводки, и все стало хорошо)))
Максим, а как организовать отложенный старт в таком случае? Держать материал в спирте всё это время? А если проводка на выходные - получится, что материал в спирте двое суток находится?
При первом старте развести первый спирт до 70% (неважно, этанол или ИПА) дист водой - это вполне приличная архивная среда, используемая во всем мире, пригодная для материала для дальнейшего ИГХ-исследования. При последующих запусках и смене спиртов, первая станция будет содержать жидкость, основу которой составит спирт примерно такой же концентрации, с той разницей, что в ней еще будут примеси жиров и еще каких-то веществ, не влияющих отрицательно на дальнейшую проводку.
Важно удалить избыток фосфатов перед проводкой. В итоге, постоянная ротация спиртов и своевременная замена других реагентов позволит проводить каждую партию в примерно одинаковых условиях.
Histotechnology - club (лаборант-гистотехник) запись закреплена
Доброго времени суток, коллеги!
Как вы после праздников? Настроились на рабочий лад?
Чтобы окончательно взбодриться, предлагаем подумать над сложной задачкой. Тут даже эксперт не сразу поймёт, где собака зарыта!
Итак, ЗАДАЧА
Дано: готовый парафиновый блок с опухолью молочной железы собаки. При заливке ткани мягкие, срезы получаются в виде дырки посередине.
Условия, в которых был изготовлен блок:
Опухоль собаки из молочной железы, после взятия сразу положена в 10% нейтральный забуференный формалин проверенного производителя и доставлена в лабораторию. Вырезана толщиной 3 мм (толщина проверена, измерена правильно). Зафиксирована в 10% нейтральном забуференном формалине (производитель проверенный, доверять раствору можно) в течение 24 часов после вырезки. Промыта в проточной воде в течение 30 минут.
Проведена по адекватному расписанию, в реактивах, которые своевременно заменяются свежими, график проводки и смены адекватный (остальные ткани получаются в этом расписании хорошо).
Время пропитывания в парафине больше 4 часов. Проводка в вакуумном процессоре надежного производителя. Расписание проводки адекватное, реактивы свежие, график замены выполняется своевременно и правильно.
Залита в парафин с точкой плавления 60оС. Заливочный парафин отличного качества.
Блоки охлаждаются до утра в морозилке.
Микротом ротационный, HM340E, лезвие одноразовое (Feater), новое. Оператор микротома опытный.
Все другие ткани, проведенные в одном прогоне с этими объектами режутся хорошо, без затруднений, толщина препаратов 3 мкм.
ВОПРОС: Что явилось причиной плохого качества препарата опухоли молочной железы?
Задача нетривиальная, поэтому дадим небольшую подсказку - это "незаметная мелочь" на одном из этапов.
Функции встряхивания и перемешивания должны быть включены на всех позициях.
Если процессор используется для фиксации образцов, время фиксации должно согласовываться с указанным в начале документа, т.е. не менее 18 часов при подогреве до 37 градусов или 24 часа без подогрева. После фиксации обязательно включить промывку водой 15-20 минут для удаления избытка фиксатора, поскольку осадки фосфатов, образующиеся при действии спирта (а не любые другие реагенты для проводки) загрязняют трубопроводы, стенки рабочей камеры и поворотного клапана и также осложняют в большинстве случаев микротомию.
Подогрев в позициях 1-8 и вакуум несколько улучшают качество проводки, и ускоряют ее, но при запуске процессора в ночь необходимости в этом нет.
При внезапном отключении электричества нет необходимости экстренного завершения проводки. В позициях 1-8 ткани можно оставить на любой срок. При застывании в станциях с парафином нужно дождаться расплавления парафина и закончить проводку. Охлажденный парафин не наносит вреда тканям. Нельзя оставлять ткани в горячем парафине дольше необходимого срока.
Опцию контроля чистоты реагентов можно не использовать, если следовать графику смены реагентов. Нет необходимости дожидаться избыточного загрязнения реагентов.
Если процессор имеет опцию долива реагентов до нужного уровня, перед началом проводки убедитесь, что в специальных емкостях для долива находится именно тот реагент, который будет доливаться в те или иные позиции.
При отсрочке старта на выходные или праздничные дни, или для окончания проводки к заданному времени, ткани удобно оставить в позиции 1 (без подогрева), но не в формалине.
Схемы проводки:
- Хирургические образцы - до 0.3 см толщиной
- Хирургические образцы - до 0.5 см толщиной
- Хирургические образцы - до 0.3 см толщиной
- Хирургические образцы - до 0.5 см толщиной
- Хирургические образцы - до 0.3 см толщиной
- Хирургические образцы - до 0.5 см толщиной
- Множество вариантов настройки протоколов проводки
- Радикальное сокращение занятости лаборанта проводкой
- Возможность ночной работы
Отзывы об использовании инновационной гистологической проводки.
«При изучении гистологических препаратов сотрудниками патологоанатомического отделения было высказано единогласное мнение о высоком качестве полученных гистологических препаратов. При этом лаборантами было отмечено отсутствие каких-либо запахов от используемых реагентов». – Городская клиническая больница № 31, г. Москва.
«Тестирование реагентов и красителей компании Блик доказало их абсолютную пригодность для гистологической обработки биоматериала с хорошим качеством итогового результата». – «Волгоградское областное патологоанатомическое бюро», Волгоград ГКУЗ «ВОПАБ», г. Волгоград.
«В результате апробации реактивов было отмечено высокое качество полученного рутинного гистологического материала. Физико-химические свойства реактивов не противоречат стандартам аппарата, что позволило не изменять его базовые настройки. Это значительно ускорило и упростило процесс загрузки аппарата.
Проводка промежуточными смесями Блик (изопропанол – минеральное масло) и чистым минеральным маслом Блик показала хорошее качество пропитывания тканей и последующую резку кусочков на микротоме.
Комплекс апробирования реактивов позволил минимизировать усилия персонала для получения высококачественного гистологического материала при большом объеме исследований.
Также отмечаем удобную упаковку реактивов (легкая, просто утилизируется).
Наборы для стандартной гистологической окраски ( гематоксилином-эозином) и гистохимической окрасок (по Ван-Гизону и по Циль-Нильсену) показали высокое качество при простоте использования». – ГБУЗ «Клинический онкологический диспансер № 1№, г. Краснодар.
ГистоКлаб - сообщество лаборантов-гистологов запись закреплена
Публикуем запись недавнего вебинара "Стандартные бизнес-процессы гистологической лаборатории и пути повышения эффективности работы". Смотрите и узнаете:
Что общего у гисто-лаборатории и завода?
Как сэкономить время и силы лаборантов на "беготню" по коридорам?
Как разделять потоки?
И многое, многое другое. Приятного просмотра!
Слайд 7: нет зоны архива и он не входит в структуру организации работы?
слайд 8: чем отличается рост текущей загрузки от роста средней загрузки?
слайд 10: а где же фиксация 24 часа, о которой говорилось на прошлом вебинаре, если в этот же день вечером все запускается в проводку? да еще и вместе биопсии и хирургии? то есть пропущен этот день для фиксации, не показан на графике?
нет перехода по дням, трудно понять весь график из-за этого.
1. Архив,разумеется, входит в структуру лаборатории. На слайде частный пример. 2. В данном случае рост был посчитан двумя способами - по загрузке лаборатории на сегодняшний день и по данным за 2018/2019 год (брали среднее). 3. Когда мы считаем TAT, мы учитываем 24 ч на фиксацию. И материал запускается в проводку на следующий день после вырезки. Показать переход на другой день на таком графике сложно. Но при расчете времени обработки материала это учитывается.
После ваших рекомендаций по поводу организации или реорганизации рабочего места,у нас в лаборатории (Уфа) все перевернулось с ног на голову. Наше руководство приняло эти советы буквально и теперь в один кабинет с микротомией перенесли процессоры,заливочную и красящую. Представляете состояние лаборантов, когда,шумят и пахнут все эти аппараты,особенно ,когда происходит смена реактивов. На скорость работы это никак не повлияло.
Миляуша, мы на вебинаре не говорили, что нужно в один кабинет с микротомией перемещать процессоры, заливочную и красящую. Даже на схеме из презентации все эти этапы разделены по разным помещениям (см.скрин).
На вебинаре речь шла о том, что удобнее, если передвижения лаборантов внутри лаборатории будут минимальны (чтобы сэкономить время на "беготню"). В остальном, конечно же, нужно полагаться на здравый смысл. Если лаборанты страдают от шума и запаха, качество их работы это вряд ли улучшит. Рекомендуем вам рассказать руководству о том, что вас беспокоит, и обсудить этот вопрос.
Тимур Юнусов
Миляуша, а мы все делаем в одной комнате, у нас вариантов нет. Но это из-за того, что просто нет исторически другого пространства. И так всю жизнь, и уже в нескольких поколениях.
Правильно было бы рассредоточить эти процессы.
Тимур Юнусов ответил Максиму
Максим, ну если у них есть возможность и помещения, зачем все в одну комнату, наши химические реактивы ни кому не приносили пользы.
Преимущества вакуумного процессора
Процессор с 4 станциями парафина (эндоскопия)
Спирт 8 мин. Вылить после проводки каждой партии.
Спирт 8 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Спирт 8 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Спирт 8 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Спирт 8 мин. Переместить на одну позицию в верх. Залить свежим.
Ксилол 10 мин. Вылить через 5 дней (ежедневного использования).
Ксилол 15 мин. Переместить на предыдущую позицию.
Ксилол 15 мин. Переместить на предыдущую позицию. Залить свежий.
Парафин 15 мин. Вылить через 5 дней (ежедневного использования).
Парафин 15 мин. Вылить в предыдущую позицию.
Парафин 15 мин. Вылить в предыдущую позицию.
Парафин 15 мин. Вылить в предыдущую позицию. Залить свежий.
Читайте также: